设为首页收藏本站
开启辅助访问
切换到窄版

 找回密码
 注册

QQ登录

只需一步,快速开始

搜索
查看: 142|回复: 0

[共享] 杆状病毒-昆虫细胞表达系统

[复制链接]
发表于 2016-10-12 10:15:33 | 显示全部楼层 |阅读模式
       杆状病毒表达系统(Baculovirus Expression Vector System,BEVS)凭借其简易的流程、高表达水平及翻译后的修饰功能,可在短时间内制备大规模翻译后修饰的蛋白,被广泛应用于病毒疫苗开发(如流感病毒和HPV疫苗开发)、信号蛋白制备、细胞因子制备等。
  金开瑞杆状病毒-昆虫细胞表达平台主要采用AcNPV(苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒)-sf9(草地夜蛾细胞系)细胞和BmNPV(家蚕核型多角体病毒)-BmN细胞两种表达系统, 多表达系统、多宿主、多载体的选择性极大的提高了蛋白表达的成功率;同时采用交配辅助遗传整合克隆(MAGIC)系统,只需简单的细菌混合,就可以快速构建重组杆状病毒质粒,阳性率高,周期短。



一、服务特色
1、多表达系统、多宿主、多载体的选择性极大的提高了蛋白表达的成功率;
2、采用交配辅助遗传整合克隆(MAGIC)系统,只需简单的细菌混合,就可以快速构建重组杆状病毒质粒,阳性率高,周期短;
3、可提供详细的表达纯化条件,实验数据以及高滴度的病毒毒株



二、服务说明
服务流程
  • 方案沟通
  • 接受订单
  • 质粒构建
  • 蛋白表达
  • 蛋白纯化
  • 成果交付



客户提供

目的蛋白信息或基因序列,质粒或cdna(也可以选择由金开瑞提供);
蛋白询价信息表(请点击下载中心,下载蛋白询价信息表后详细填写)。

最终交付

已构建好的pfastbac质粒,bacmid质粒,P1、P2及P3代病毒、纯化所得蛋白;
表达产物质量检测报告,包括载体构建方案、克隆实验图片、蛋白表达、纯化图谱等。


三、服务周期及报价

服务名称
服务项目
服务内容
交付结果
服务周期
服务报价
杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务
1.获得重组供体质粒
基因的获得
核酸电泳图片
2周
请询价
PCR扩增产物酶切连接到本公司改造过的pFastBac载体上
转化E.coliDH10β
获得测序正确的重组质粒
2.病毒扩大化培养
构建重组杆状病毒质粒
重组杆状病毒质粒电泳图片
3-4周
请询价
重组杆状病毒质粒转染昆虫细胞
高滴度的病毒贮液
获得高滴度的病毒贮液
3.优化表达
高滴度的病毒贮液再次感染昆虫细胞
SDS-PAGE电泳图及western blot分析
1.5周
请询价
表达产物SDS-PAGE电泳及western blot检测
4.蛋白表达及纯化
1L昆虫细胞表达体系及蛋白的纯化
已纯化的蛋白QC报告
1-2周
请询价


四、案例展示

案例1
      客户需要表达某种蛋白,但经数次实验未能成功,在与金开瑞合作后,我们对其序列情况进行详细分析,将基因片段克隆到我们经过改造的载体上,然后转染BmN家蚕细胞。最终从1L的sf9培养体系中纯化得到目的蛋白2mg,且纯度达90%,得到客户的认可。



       案例2
      客户需要制备一个诊断试剂校准品,我们在制定详细的实验计划后,成功表达了该蛋白,并将其与天然蛋白进行了测值相关性比对,结果显示昆虫细胞表达的重组蛋白与其对应的天然蛋白相关性很高,证明了该重组蛋白可以替代天然蛋白成为诊断试剂校准品。



       案例3
      应客户要求,我们利用AcNPV-sf9细胞表达系统成功表达了某种酶,通过查阅相关文献制定了该酶的酶活力测试实验,最后测定我们所表达的重组酶的酶活力为430.8U/mg,远高于文献报道的254.9 U/mg。



您需要登录后才可以回帖 登录 | 注册

本版积分规则

QQ|申请友链|小黑屋|手机版|Archiver|生物信息学论坛 ( 蜀ICP备09031721号  

GMT+8, 2017-1-22 18:12 , Processed in 0.157280 second(s), 23 queries .

Powered by Discuz! X3

© 2001-2013 Comsenz Inc.

快速回复 返回顶部 返回列表