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[共享] 小分子抗体定制

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发表于 2016-10-13 10:14:58 | 显示全部楼层 |阅读模式
服务简介

小分子抗体,即用小分子化合物偶联载体蛋白作为免疫原所制备的抗体,主要用于食品安全及药物残留相关小分子化合物的检测等。
       您是否还在为常规检测分析方法(高效液相色谱法、高效液相色谱-串联质谱法)的高成本而束手束脚?
金开瑞现提供从小分子抗原合成、抗原偶联、动物免疫、细胞融合、杂交瘤建立/筛选到抗体制备/纯化的一站式小分子抗体制备服务,并提供高灵敏度ELISA试剂盒和胶体金检测试纸/卡开发,打破研究和应用之间的壁垒,真正实现从科研到产业化的华丽转身。


小分子抗体应用

①小分子化合物的快速安全检测
       ②食品安全检测,如抗生素、违禁添加、药物滥用等
       ③疾病相关的代谢中间体检测,监测血药浓度
       ④毒品检测,兴奋剂检测等


服务流程
  • 您提供项目名称及开发需求
  • 金开瑞合成小分子抗原并偶联
  • 单克隆抗体制备、筛选及纯化
  • 高灵敏度EILISA试剂盒开发
  • 高灵敏度胶体金检测试纸开发


服务内容
服务内容
交付结果
交付周期
小分子抗原合成并偶联完全抗原及其SDS-PAGE或UV鉴定结果1-2个月
单克隆抗体制备1-2株杂交瘤细胞株,100ul腹水原液以及5ml腹水纯化的抗体3-4个月
ELISA试剂盒/胶体金检测试纸开发ELISA试剂盒/胶体金检测试纸成品1-2个月



案例展示

小分子ELISA试剂盒开发

项目背景客户提供:

药物代谢分子**原料、标准品和ELISA检测的阳性和阴性血清样本。

客户要求:

1、提供试剂盒所需的高灵敏度抗体(IC50≈1-2ppb)
2、提供ELISA试剂盒标准曲线图及标准曲线线性范围;
3、提供检测样本数据;
4、提供ELISA基本参数评价结果[LOD(最低检测限);批内和批间变异系数;37℃加速稳定性实验];
5、定制的ELISA试剂盒成品(包被好的酶标板及配套的试剂盒组分等。)


结果展示

药物代谢分子**试剂盒的标准曲线各项参数

Conc
OD1
OD2
Mean
SD
CV%
BLK
0
2.086
2.010
2.048
0.054
2.630
STD1
0.025
1.811
1.802
1.806
0.007
0.360
STD2
0.050
1.358
1.348
1.353
0.007
0.500
STD3
0.100
0.943
0.971
0.957
0.020
2.080
STD4
0.200
0.533
0.552
0.542
0.014
2.520
STD5
0.500
0.298
0.297
0.297
0.000
0.140
STD6
1.000
0.229
0.223
0.226
0.004
1.720

药物代谢分子**试剂盒的标准曲线拟合图

项目小结

该项目历经5个月,最终开发出IC50=0.2ppb的单克隆抗体,远远超出客户要求的1~2ppb,鉴于该抗体的高灵敏度,我公司直接建议客户开发跟液相质谱结果参照的高敏反应试剂盒。(备注:由于样本较难获取,该项目历时较长,但研发成功的成品试剂盒各项数据参数均超出客户的预期!)




小分子胶体金检测卡开发

项目背景客户提供:

***原料、标准品和胶体金检测的阳性和阴性样本以及该项目进口胶体金检测卡5份

客户要求:

1、提供胶体金所需的高灵敏度抗体;
2、提供合适的划膜抗原浓度及金标抗体浓度和相应的稀释液,及相应的试纸条的标准品消线浓度;
3、提供检测样本数据;
4、提供胶体金基本参数评价结果[LOD(最低检测限);交叉反应率;加速稳定性实验;均一性]
5、定制的胶体金成品(检测卡及配套的组分等)


结果展示

1、抗体灵敏度及特异性:

线性相关系数R2≥0.98;IC50:0.369±0.05ppb;与其他小分子交叉率均<0.1%

校准品
***小分子
校准品
小分子1
小分子2
小分子3
小分子4
OD
OD
OD
OD
OD
0
2.601
0
2.609
2.672
2.672
2.734
0.025
2.217
0.5
2.754
2.719
2.594
2.742
0.075
2.028
2.5
2.598
2.591
2.508
2.557
0.225
1.644
5
2.635
2.51
2.603
2.709
0.675
0.869
10
2.793
2.782
2.771
2.937
2.025
0.276
50
2.742
2.826
2.64
2.859
100
2.609
2.586
2.476
2.641
R2
0.988
IC50
0.369

2、胶体金检测卡成品:

2.1 划膜条件

T线:***小分子-BSA    划膜浓度:0.5mg/ml
       C线:羊抗鼠IgG(5.0mg/ml     划膜浓度:0.6mg/ml

2.2 金标抗体

***小分子(42-7)单抗 (原始浓度:1.0mg/ml),标记后浓度:4ug/ml

2.3、结论

阴性C、T线正常; 阳性(100ul纯水添加1ppb***小分子)C线正常,T线消线。

项目小结

该项目历经11个月,最终开发出1ppb可消线的胶体金检测卡,远远超出客户的预期,鉴于该胶体金的灵敏度,客户与我公司建立了后期大量开发的协议,建立了良好的合作关系。(备注:由于样本较难获取,项目历时较长,但研发成功的成品胶体金检测卡各项数据参数均超出客户的预期!)




小分子胶体金检测卡开发

小分子A单克隆抗体

1. 零值OD值:1.8-2.1;
       2. 灵敏度(0.05ppb B/B0):90%~80%;
       3. 4.05ppb B/B0:<10%;
       4. 线性相关系数R2≥0.99;IC50:0.16±0.01ppb;

5. 交叉反应率:小分子A与小分子1、2、3的交叉反应率均小于1%

校准品(ppb)
**
校准品(ppb)
小分子1
小分子2
小分子3
OD
OD
OD
OD
0
2.102
0
2.2816
1.9292
1.8454
2.042
2.1895
1.594
2.0306
0.05
1.713
2.5
2.5427
2.4528
2.4111
1.706
2.4342
2.3541
2.3565
0.15
1.089
5
2.4364
2.4755
2.4502
0.5
0.546
10
1.4292
1.3749
1.9973
1
0.413
20
2.3306
1.9765
2.0693
2
0.3015
40
2.1805
1.9356
1.7221
R2
0.99807
IC50
0.168

小分子B单克隆抗体

1. 零值OD值:1.8-2.0;
       2. 灵敏度(0.025ppb B/B0):90%~80%;
       3. 2.025ppb B/B0:<10%;<10%;
       4. 线性相关系数R2≥0.99;IC50:0.2±0.05ppb;

5. 交叉反应率:小分子B与小分子1、2、3、4、5、6、7、8的交叉反应率均小于1%


校准品
小分子B
校准品
小分子1
小分子2
小分子3
小分子4
小分子5
小分子6
小分子7
小分子8
OD
OD
OD
OD
OD
OD
OD
OD
OD
0
2.035
0
2.008
2.032
2.101
1.99
1.921
2.148
1.768
2.338
0.025
1.966
0.5
2.053
2.132
2.126
1.967
2.012
2.026
1.913
2.169
0.075
1.49
2.5
2.172
2.09
2.079
1.968
1.933
1.832
2.165
2.183
0.225
0.985
5
2.025
2.161
2.009
2.12
1.8
1.885
1.827
2.282
0.675
0.491
10
2.09
2.232
2.159
1.992
2.021
2.05
1.115
2.211
2.025
0.164
50
1.963
2.158
2.239
2.054
2.158
1.658
1.338
2.275
100
1.746
2.238
2.168
2.115
2.098
1.949
2.185
2.47
R2
0.98855
IC50
0.21157



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